雷公藤多苷对斑马鱼耳毒性及其防护初步观察

Preliminary Experimental Study on the Toxicity and Protection of the Tripterygium Glycosides Based on the Zebrafish Model

唐旭霞;石涯;谌晶晶;徐慧芳;韩朝;

1:浙江省中医院耳鼻咽喉科

2:复旦大学附属眼耳鼻喉科医院

摘要
目的研究雷公藤多苷对斑马鱼的耳毒性,并初步探索其防护方法。方法 (1)使用不同浓度雷公藤多苷和二甲基亚砜饲养5dpf(受精后5天)AB系斑马鱼,对雷公藤多苷进行浓度摸索实验,确定最大非致死浓度(MNLC)。(2)依据雷公藤多苷MNLC选取4个浓度(MNLC、1/2MNLC、1/4MNLC、1/8MNLC),并将浓度为2.5μg/ml的庆大霉素作为阳性对照组,分别饲养30尾斑马鱼24h后,用DASPEI染料对听细胞进行荧光染色,评价雷公藤多苷的耳毒性。(3)观察谷胱甘肽以及不同浓度的地塞米松对雷公藤多苷10.5μg/ml(1/2最大非致死浓度)诱导听细胞毒性的保护作用,将谷胱甘肽和庆大霉素2.5μg/ml作为阳性对照组。结果 (1)雷公藤多苷的MNLC为21μg/ml。(2)雷公藤多苷剂量2.625、5.25、10.5、21μg/ml对应听细胞损伤率分别为8.9%、10.9%、46.9%、92.4%,其中,10.5μg/ml和21μg/ml与未加入雷公藤多苷的空白对照组相比,听细胞损伤率明显升高,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。(3)雷公藤多苷10.5μg/ml对听细胞损伤率达46.9%,谷胱甘肽干预后,听细胞损伤率达81.8%,两者差异有显著统计学意义(P<0.01);12.5、25、50μM地塞米松分别干预后,各组听细胞损伤率为64.2%、67.7%、60.8%,两两比较差异均无统计学意义(P> 0.01)。结论雷公藤多苷有耳毒性,呈剂量依赖关系;谷胱甘肽和地塞米松对雷公藤多苷诱导听细胞毒性均无明显保护作用。
关键词
雷公藤多苷;耳毒性;谷胱甘肽;地塞米松;斑马鱼
基金项目(Foundation):
浙江省卫生厅基金项目(2015KYB266);; 浙江省中医院课题(2A11658-01);; 浙江省中医药管理局基金项目(2018ZQ018)
作者
唐旭霞;石涯;谌晶晶;徐慧芳;韩朝;
参考文献

1 Montgomery J,Carton G,Voigt R,et al.Sensory processing of water currents by fishs[J].Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci,2000,355:1325.

2 Raible DW,Kruse GJ,Organization of the lateral line system in embryonic zebrafish[J].J Comp Neural,2000,421:189.

3 Nicolson T,The genetics of hearing and balance in zebrafish[J].Annual Review of Genetics,2005,39:9.

4 Ton C,Parng C.The use of zebrafish for assess in otoxic and otoprotective agents[J].Hear Res,2005,208:79.

5 Chiu LL,Cunningham LL,Raible DW,et al.Using the zebrafish lateral line to screen for ototoxicity[J].J Assoc Res Otolaryngol,2007,9:178.

6 Hirosed Y,Simon JA,Ou HC.Haircell toxicity in anti-cancer drugs:evaluating an anti-cancer drug library for independent and synergistic toxic effects on haircells using the zebrafish later line[J].J Assoc Resotolaryngol,2001,12:719.

7夏志林,郑幼兰.雷公藤内酯的药理和临床研究[J].中国药理学通报,1992,6:427.

8黄伟,冯群,等.雷公藤不同样品对正常小鼠急性毒性实验研究[J].中国药物警戒,2014,11:1.

9运乃茹,甘井山.雷公藤及其制剂临床不良反应概述[J].天津药学,2012,24:18.

10李一北,盛梅笑,许陵冬,等.雷公藤多苷治疗糖尿病肾病疗效观察[J].山东中医杂志,2017,36:374.

11李松伟,郭洪涛,王子华,等.雷公藤多苷治疗类风湿关节炎肺间质病变的临床研究[J].中华中医药学刊,2017,35:1662.

12林燕,窦一田,杨洪涛.雷公藤多苷治疗原发性肾病综合征的回顾性研究[J].中国中西医结合肾病杂志,2011,12:897.

13罗岚,江振洲,张陆勇.雷公藤多苷肝毒性发生机制及减毒相关研究进展[J].药物评价研究,2017,40:1504.

14马成功,纪伟,李红刚.雷公藤多苷片生殖系统毒性及增效减毒研究进展[J].辽宁中医药大学学报,2011,13:88.

15杨静娴,韩国柱,徐红,等.五子四物瓜石汤对抗雷公藤多苷所致消化系统毒性的研究[J].中药药理与临床,2002,18:35.

16任强,岑国栋,高永翔.雷公藤多苷诱导大鼠肾细胞凋亡的NF-кB信号转导通路机制研究[J].成都中医药大学学报,2011,34:39.

17但红,彭仁琇,敖英,等.雷公藤多苷肾毒性作用机制[J].中国药理通讯,2007(3):39.

18张绘芳.还原型谷胱甘肽的作用机制及临床应用[J].医学信息,2015,28:393.

19范为民,王小琴.JNK信号通路在庆大霉素诱导肾损伤大鼠细胞凋亡中的机制及左归丸干预作用研究[J].中华中医药杂志,2013,28:1346.

20陈象青,王钦茂.白芍总苷与当归提取物合用对实验性肝炎的保护作用[J].安徽中医学院学报,2002,21:44.

21周艳丽,张磊,刘维.白芍总苷对雷公藤多苷片所致小鼠急性肝损伤的保护作用的实验[J].天津中医药,2007,24:61.

22周毅骏,钦丹萍,杨强,等.雷公藤多苷对TNBS/乙醇溃疡性结肠炎大鼠脂质过氧化损伤的保护作用[J].中药药理与临床,2017,33:77.

23潘景轩,朱振宇,李惠玲,等.糖皮质激素诱导大鼠胸腺细胞程序性死亡研究[J].中国免疫学杂志,1996,12:228.

24郑鸣,王丰,梁书锋.地塞米松对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响[J].解剖学杂志,2006,29:238.

25周亚平.地塞米松鼓室灌注治疗突聋的临床疗效分析[J].中国医药指南,2017,15:110.