补肾活血化痰开窍方对耳鸣大鼠耳蜗螺旋神经节神经元5-HT1B、2C受体表达的影响

The Effects of Bushen Huoxue Huatan Kaiqiao Decoction on the Expression of 5-HT1B,2C in Cochlear Spiral Ganglion Neurons in Tinnitus Rats

孙勤国;罗蒙;江波;郭乃燕;张贤梅;徐鸿婕;牟艳杰;吕琨;杨倩;

1:武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院)中医科

2:湖北中医药大学

摘要
目的探讨补肾活血化痰开窍方对耳鸣大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neurons,SGN)中5羟色胺(serotonin,5-HT)1B、2C受体的表达及意义。方法 60只健康SPF级雄性大鼠随机分为正常组10只(生理盐水组),耳鸣模型组50只(采用水杨酸钠腹腔注射联合"饮水抑制"大鼠行为学实验方法建立大鼠耳鸣模型),耳鸣模型组造模成功后再分为水杨酸钠组10只、中药组30只(补肾活血化痰开窍方低、中、高剂量组各10只)、西药组(卡马西平组)10只,除水杨酸钠组给予生理盐水灌胃外,各组给予相应药物干预8周,造模成功后运用免疫组化法检测各组耳蜗SGN中5-HT1B、2C受体的表达。结果耳鸣造模成功并给予相应药物干预8周后,各组大鼠耳蜗SGN中均有5-HT1B、2C受体的表达,与生理盐水组相比,水杨酸钠组中5-HT1B表达减少,5-HT2C表达明显增多;与水杨酸钠组相比,中药各剂量组耳蜗SGN中5-HT1B表达增多,2C表达均明显降低。结论耳鸣大鼠耳蜗SGN中的5-HT1B受体表达减少、5-HT2C表达增加,应用补肾活血化痰开窍方后5-HT1B表达增多而5H2C表达降低,产生了拮抗作用,该方可能应用于耳鸣的治疗。
关键词
补肾活血化痰开窍方;耳蜗螺旋神经节神经元;5羟色胺1B、2C受体;耳鸣
基金项目(Foundation):
武汉市卫生和计划生育委员会科研项目(WZ15A06);; 湖北省卫生和计划生育委员会科研项目(2013Z-B22)
作者
孙勤国;罗蒙;江波;郭乃燕;张贤梅;徐鸿婕;牟艳杰;吕琨;杨倩;
参考文献

1 Olivier B.Serotonin:a never-ending story[J].Eur J Pharmacol,2015,1:218.

2 Hebert S,Canlon B,Hasson D,et al.Tinnitus severity is reduced with reduction of depressive mood-aprospective population study in Sweden[J].P1oS One,2012,7:e37733.

3 Johansson SE,Larsen SS,Povlsen GK,et al.Early MEK1/2inhibition after global cerebral ischemia in rats reduces brain damage and improves outcome by preventing delayed vasoconstrictor receptor upregulation[J].PLoS One,2014,9:e92417.

4 Oh CK,Drescher MJ,Hatfield JS,et al.Selective expression of serotonin receptor transcripts in the mammalian cochlea and its subdivisions[J].Molecular Brain Research,1999,70:135.

5 祁青,孙勤国,江波.补肾活血化痰汤联合针刺治疗老年性神经性耳鸣的临床观察[J].湖北中医杂志,2013,35:40.

6 梁琼,王武庆.耳鸣动物模型的研究进展[J].听力学及言语疾病杂志,2013,21:431.

7 杨松柏,梅志刚,谭凌菁.耳迷走神经分布区穴位电刺激配合声音掩蔽法对耳鸣大鼠听性脑干反应及下丘神经递质的影响[J].中国针灸,2016,05:517.

8 Jastreboff PJ,Sasaki CT.An animal model for tinnitus:a decade of development[J].Am J Otol,1994,15:19.

9 刘晓洁,梅志刚.耳鸣的发生机制及迷走神经刺激调节作用[J].中国老年学杂志,2014,3:1698.

10 黄治物,吴皓.耳鸣中枢化机制与临床诊疗[J].临床耳鼻咽喉头颈外科杂志,2014,28:222.

11 杨光,李明.听觉通路神经递质及受体与耳鸣[J].听力学及言语疾病杂志,2008,16:529.

12 李露露,张兰,殷宏,等.5—羟色胺1B受体基因G861C多态性与情感精神障碍的关联性分析[J].临床荟萃,2010,25:883.

13 王星华,殷盛明,于德钦.5-HT2C受体的RNA编辑作用[J].生理科学进展,2013,44:463.

14 Zirke N,Seydel C,Arsoy D,et al.Analysis of mental disorders in tinnitus patients performed with Composite International Diagnostic Interview[J].Qual Life Res,2013,22:2095.

15 Hurley LM,Tracy JA,Bohorquez A.Serotonin 1Breceptor modulates frequency response curves and spectral integration in the inferior colliculus by reducing GABAergic inhibition[J].J Neurophysiol,2008,100:1656.

16 Sakai S,Tabuchi K,Murashita H,et al.Activation of the GABA(A)receptor ameliorates the cochlear excitotoxicity caused by kainic acid in the guinea pig[J].The Tohoku Journal of Experimental Medicine,2008,215:279.

17 姚晨,蔡正,王仁君,等.水杨酸钠影响耳蜗螺旋神经节神经元GABAa受体亚单位的表达[J].临床耳鼻咽喉头颈外科杂志,2015,29:1024.

18 柳玉芳,伍伟景.5-羟色胺与耳鸣发生机制[J].国际耳鼻咽喉头颈外科杂志,2001,25:346.

19 李石良,李辉,史榕荇,等.耳鸣患者电针治疗前后自觉症状与椎-基底动脉血流速度变化的初步研究[J].中国临床研究,2013,5:6.

20 杨海弟,郑亿庆,区永康,等.耳鸣患者静息态MR的局部区域一致性研究[J].中华耳科学杂志,2014,12:203.

21 王静,郭春荣,董杨,等.耳聋左慈丸及有效拆方拮抗庆大霉素诱导毛细胞凋亡的实验研究[J].中国中药杂志,2010,35:2464.

22 宁剑,郑沙盟.中药葛根治疗耳鸣的机制探讨[J].浙江中西医结合杂志,2012,01:17.

23 杨雪,季红,刘颖男,等.山茱萸多糖提取纯化方法及药理作用研究进展[J].中国老年学杂志,2015,35:1984.

24 冯波,靖慧军,郭敏娟,等.石菖蒲挥发油和水煎液的抗焦虑作用[J].中国实验方剂学杂志,2014,20:207.

25 安磊.蝉蜕的抗惊厥作用[J].中国医药导报,2008,15:35.

26 冯爱成,陈婷丽,谢艺,等.耳鸣与微量元素铁、锌、铜的相关性研究[J].中国眼耳鼻喉科杂志,2014,14:245.

27 石倩,刘萍.中西医治疗耳鸣研究概况[J].实用中医内科杂志,2015,29:158.

28 白云丹,喻超,唐玥玓.5羟色胺1B受体在小鼠耳蜗螺旋神经元上的表达及意义[J].西部医学,2012,24:1056.

29 赵德安,高兴强,刘存山,等.耳鸣大鼠耳蜗核5-HTR1B/2 C、GABA、GluR1/2表达的研究[J].听力学及言语疾病杂志,2007,15:390.