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豚鼠脑缺血再灌注后听皮层内质网应激相关因子的表达及意义

Expression of the ERS-associated Factors on Auditory Cortex after Brain Ischemia Reperfusion Injury in Guinea Pig

吕哲;张颖;王团;徐鸥;路虹;

1:河北医科大学第二医院耳鼻咽喉科

2:河北省邯郸市第三医院耳鼻喉科

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摘要

目的观察豚鼠脑缺血再灌注后葡萄糖结合蛋白(glucose-regulated protein,GRP78)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(caspase-12)在听皮层的表达,探讨内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)在脑缺血再灌注后听皮层神经元凋亡中的作用。方法选取健康豚鼠50只,随机分为5组:正常对照组、A组(缺血再灌注6h)、B组(缺血再灌注12h)、C组(缺血再灌注24h)、D组(缺血再灌注72h)。采用夹闭双侧颈总动脉的方法建立脑缺血再灌注损伤模型,分别在脑缺血再灌注后6、12、24、72h行听性脑干反应(ABR)测试后处死各组豚鼠,应用HE染色法观察听皮层神经元病理变化,免疫组化染色及Western-blot方法检测各组GRP78、caspase-12的表达。结果从正常对照组到B组豚鼠ABR反应阈值逐渐增加,从C组到D组又逐渐下降,但D组仍比正常对照组高(P<0.05)。HE染色示正常对照组听皮层神经元排列整齐,胞浆丰富,胞核大而圆,染色清晰;A、B、C、D组听皮层神经元均有不同程度的数量减少,且体积萎缩,胞核固缩,碎裂,核仁消失。免疫组化染色及Western-blot示正常对照组GRP78、caspase-12蛋白仅有微量或少量表达,缺血再灌注后6h,二者表达开始上调,至12h GRP78表达达到高峰,12h后逐渐降低,各组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。caspase-12表达24h达到峰值,后逐渐下降,缺血再灌注6h组与12h组间差异无统计学意义,其余各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脑缺血再灌注损伤可诱发内质网应激,使GRP78、caspase-12表达增加,GRP78、caspase-12可能参与了ERS介导的听皮层神经元细胞凋亡过程。

关键词

内质网应激;缺血再灌注损伤;凋亡

基金项目(Foundation):

河北省卫计委医学科学研究基金(ZL20140118)资助

作者

吕哲;张颖;王团;徐鸥;路虹;

参考文献

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内质网应激缺血再灌注损伤凋亡

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