GJB2基因条件敲除小鼠耳蜗凋亡相关基因表达差异研究

The Apoptosis-Related Gene Differential Expression in the Cochlea of GJB2 Gene Conditional Knockout Mice

崔小缓;张延平;张晓强;李丽娜;蒋兴旺;

1:河北北方学院

2:解放军第309医院耳鼻咽喉科

摘要
目的研究GJB2基因条件敲除(cCx26Pax2Cre)小鼠耳蜗膜迷路细胞中凋亡相关基因的差异性表达情况,探讨GJB2基因突变导致耳聋的机制。方法由Cx26loxp/loxp和Pax2Cre/+小鼠杂交产生的cCx26Pax2Cre小鼠为实验组,野生型BALB/C小鼠作为正常对照组,两组分别选取P10和P18小鼠各3只,提取耳蜗膜迷路总RNA,反转录成cDNA,用QRT-PCR Array检测两组与凋亡相关的84个功能基因的表达差异。结果与野生型小鼠相比,cCx26Pax2Cre小鼠在P10时,共有16个基因表达有生物学意义(19.05%,16/84),其中14个基因表达下调(87.5%,14/16),包括9个抑制细胞凋亡和促进细胞增殖的基因下调和5个促进细胞凋亡和炎症反应的基因下调,2个基因表达上调(12.5%,2/16),均为促进细胞凋亡的基因,此期促进细胞凋亡的趋势十分明显;在P18时,共有4个基因(4.76%,4/84)表达变化有生物学意义,包括3个基因表达下调(75%),全部为抑制细胞凋亡的基因(100%),1个基因表达上调(25%),为促进细胞凋亡的基因,总体趋势仍为促进细胞凋亡的发生。与P10相比,cCx26Pax2Cre小鼠P18时耳蜗组织中共6个基因表达变化有生物学意义,其中促进细胞凋亡的caspase-8基因和抑制细胞凋亡的No13基因表达上调(33.3%,2/6),4个基因表达下调(66.7%,4/6),包括促进细胞凋亡的Tnfrsf10b、Cideb基因和抑制细胞凋亡的CD40、Bc110基因。结论 GJB2基因敲除后,可能通过上调死亡受体5(death receptor 5,DR5)激活死亡受体途径直接导致细胞凋亡,同时也可能通过caspase-8间接激活线粒体通路使凋亡信号进一步放大,最终引起cCx26Pax2Cre小鼠耳蜗细胞的广泛缺失和听力下降。
关键词
缝隙连接蛋白26;凋亡;耳聋;感音神经性;基因
基金项目(Foundation):
2013年度全军保健专项科研课题(13BJZ24);; 全军十二五面上项目(11MS013);; 国家自然科学基金面上项目青年基金(30700936);; 中国人民解放军第309医院院内基金(LCB08MS12、309-09-03);; 北京市自然科学基金(7142155)资助
作者
崔小缓;张延平;张晓强;李丽娜;蒋兴旺;
参考文献

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