单只小鼠耳蜗总RNA提取方法
张晓强;张延平;
1:解放军第309医院耳鼻咽喉科
摘要目的探索一种高效、简便的小体积组织RNA提取方法。方法取单只野生型BALB/c小鼠或GJB2条件敲除小鼠cCx26loxp/loxp-Pax2Cre/+(cCx26ko)P10、P18耳蜗膜迷路组织,采用与EP管底部体积、形状均相似的玻璃研磨棒在裂解液中进行组织破碎,提取RNA后用琼脂糖电泳、紫外分光光度计检测所提取RNA的质量和完整性及浓度。结果本实验单只小鼠耳蜗中获得的总RNA紫外光吸光值(260/280)均在1.9～2.1之间,电泳结果显示28S和18S的条带清晰度高,PCR产物扩增出的目的基因片断单一,说明其完整、质量高且纯度高。结论单只小鼠耳蜗总RNA的提取方法操作简便、成本低廉且相对安全和快速,提取效率较高,适合于小体积组织RNA的提取。
关键词小鼠耳蜗;RNA提取
基金项目(Foundation):全军十一五项目归国人员课题(06H048);; 全军十二五面上项目(11MS013);; 国家自然科学基金面上项目青年基金(30700936);; 中国人民解放军第309医院院内基金(LCB08MS12、309-09-03)
作者张晓强;张延平;
参考文献1陈茂华,韩召军.禾谷缢管蚜、麦长管蚜乙酰胆碱酯酶基因片段的克隆与序列分析[J].南京农业大学学报,2006,29:35.
2邓顺,张友军,褚东.一种提取小型昆虫的RNA提取的有效方法[J].昆虫知识,2007,44:593.