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胶原-壳聚糖膜在组织工程化鼓膜中的应用

In Vitro Study of the Application of Collagen-Chitosan Tissue Engineering Membrane on Rat Tympanic Membrane

汤勇;孙建军;雷菲;

1:海军总医院全军耳鼻咽喉科中心

2:吉林省人民医院耳鼻咽喉科

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摘要

目的探讨胶原-壳聚糖膜(collagen-chitosan tissue engineering membrane,CCM)在体外对鼓膜上皮层角朊细胞(keratinocyte,KC)、纤维层成纤维细胞(fibroblast,FB)生长、增殖以及胶原分泌功能的影响。方法热干法制备CCM,传代的大鼠鼓膜上皮KC和FB分别接种于培养板及CCM表面,通过角蛋白、细胞膜波形蛋白免疫荧光染色鉴定细胞特异性,通过细胞核增殖抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)免疫荧光染色测定膜上细胞的增殖能力,通过细胞培养液上清的羟脯氨酸测定评价对FB胶原分泌功能的影响。结果传代的大鼠鼓膜上皮KC和FB在CCM上生长,细胞形态及角蛋白、细胞膜波形蛋白免疫荧光染色阳性结果均未见明显改变。分别在培养板及CCM上接种6天的KC和FBPCNA染色荧光强度差异无统计学意义(P>0.05)。在培养板和CCM上接种6天的FB培养液上清中胶原含量分别为(11.26±0.68)×10-2和(12.02±0.8)×10-2(单位为每微克蛋白含胶元的微克量),差异无统计学意义(P>0.05)。结论体外实验证实热干法制备的CCM适合鼓膜KC和FB生长、增殖,FB可以保持良好的胶原分泌功能。

关键词

鼓膜;角朊细胞;成纤维细胞;胶原;壳聚糖

基金项目(Foundation):

中国博士后科学基金项目(20070420565)

作者

汤勇;孙建军;雷菲;

参考文献

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鼓膜角朊细胞成纤维细胞胶原壳聚糖

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