耳蜗组织低温包埋切片技术

Cryoembedding and Sectioning of Cochleas

胡吟燕;孙建和;汪学勇;翟所强

1:解放军总医院耳鼻咽喉科研究所

2:解放军总医院耳鼻咽喉科研究所

3:解放军总医院耳鼻咽喉科研究所

4:解放军总医院耳鼻咽喉科研究所 北京100853

摘要
目的探索一种新的耳蜗组织切片方法,以获得高质量的切片,满足其免疫组织化学染色的需要。方法取1天龄大鼠、成年豚鼠、成年小鼠耳蜗标本经蔗糖快速浸透,用离心管定向并用新型组织包埋剂Tissue-Tek(OCT)包埋,液氮中快速冷冻后在恒冷箱切片机中切片,然后分别做苏木素、伊红染色和免疫组化染色,观察组织切片的形态结构。结果经免疫荧光和组织化学染色后组织切片形态结构完整,耳蜗基底膜平直,盖膜及前庭膜完整,毛细胞与支持细胞间结构完整,细胞核清晰。结论耳蜗组织免疫组化染色应选择低温包埋切片技术制作的切片。
关键词
冰冻切片;耳蜗;毛细胞
基金项目(Foundation):
作者
胡吟燕;孙建和;汪学勇;翟所强
参考文献

1 EybalinM,RenardN,AureF,etal.Cysteine-stringproteinininner haircellsoftheorganofcorti:synapticexpressionandupregulationat theonsetofhearing[J].Europeanjournalofneuroscience,2002,15:1409.

2 SafieddineS,WentholdRJ.Theglutamatereceptorsubunitdelta1is highlyexpressedinhaircellsoftheauditoryandvestibularsystems[J].JNeurosci,1997,17:7523.

3 WhitlonDS,SzakalyR,GreinerMA.Cryoembeddingandsectioning ofcochleasforimmunocytochemistryandinsituhybridization[J].Brain ResProtoc,2001,6:159.

4 BianchiLM,LiuH.Comparisonofephrin-aligandandEphArecep tordistributioninthedevelopinginnerear[J].AnatRec,1999,254:127.

5 龚志锦,詹熔洲,编著.病理组织制片和染色技术[M].上海:科学技术出版社,1999.26~27.

6 邱建勇,刘惠玲,鞠躬,等.一种冰冻切片漂片法免疫反应后再用石蜡切片的方法[J].中国组织化学与细胞化学杂志,1996,4:476.

7 兰向昀.浅谈如何提高冰冻切片的制作质量[J].山西医学院学报,1996,4:314.

8 谭艳,李忠华.冰冻切片着色的改良方法[J].中国临床解剖学杂志,1995,13:74.

9 丁伟.影响切片质量因素的探讨[J].诊断病理学杂志,1995,2:238.

10 SobkowiczHM,LoftusJM,SlapnickSM.Tissuecultureoftheorgan ofCorti[J].ActaOtolaryngol,1993(suppl),502:3.

11 BarthelLK,RaymondPA.Improvedmethodforobtaining3-mi cronscryosectionsforimmunocytochemistry[J].JHistochemCyto chem,1990,38:1383.

本文信息

PDF(161k)

本文关键词相关文章

冰冻切片耳蜗毛细胞

本文作者相关文章

胡吟燕孙建和汪学勇翟所强