首页 > 过刊浏览 > 文章详情

酵母双杂交技术分析耳聋基因功能的实验研究

Experimental Study of Yeast Two-hybrid Technique to Explore the Deafness Genes’ Functions

肖自安;谢鼎华;房海燕;黄亮群;施小六;夏家辉

1:中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉科和听力研究室

2:中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉科和听力研究室

3:中南大学医学遗传学国家重点实验室

4:中南大学医学遗传学国家重点实验室

在线阅读

摘要

目的　在耳聋基因功能的蛋白质相互作用研究领域建立酵母双杂交实验技术 ,探讨第三代酵母双杂交系统在该领域的应用价值。方法　利用第三代MATCHMAKERGAL4酵母双杂交系统 ,以最常见的耳聋基因GJB2(Cx2 6 )为诱饵 ,以人胎脑cDNA文库为猎物 ,钓取Cx2 6的相互作用蛋白质的阳性克隆 ,DNA测序阳性克隆并行生物信息学分析。结果　从胎脑文库筛选到Cx2 6互作蛋白的 5 6个阳性克隆 ,对其中 2 6个克隆分析认定为 11个独立克隆 ,DNA测序发现 3个克隆是已克隆基因 ,8个克隆是新基因序列。结论　第三代MATCHMAKERGAL4酵母双杂交系统是筛选Cx2 6相互作用蛋白质的一个可靠的实验手段 ,酵母双杂交技术可用于耳聋基因的蛋白质功能研究领域

关键词

酵母双杂交技术;耳聋基因;克隆

基金项目(Foundation):

国家自然科学基金资助课题 (编号 :3 0 0 0 0 0 94,3 0 0 70 80 7)

作者

肖自安;谢鼎华;房海燕;黄亮群;施小六;夏家辉

参考文献

1　谢鼎华,肖自安,叶胜男.遗传性聋分子病因研究进展[J].中华耳鼻咽喉科杂志,2000,35:155.　

2　VidalM ,LegrainP .Yeastforwardandreverse‘n’-hybridsystem[J].NucleicAcidRes,1999,27:919.　

3　杨齐衡,李林.酵母双杂交技术及在蛋白质组研究中的应用[J].生物化学与生物物理学报,1999,3:221.　

4　肖自安,冯永,潘乾,等.非综合征性耳聋患者连接蛋白26基因突变的研究[J].中华耳鼻咽喉科杂志,2000,35:188.　

5　李佰良.功能蛋白质组学[J].生命的化学,1998,18:1.　

6　FriedmanTB ,SellersJR ,AvrahamKB .Unconventionalmyosinsandthegeneticsofhearingloss[J].AmJMedGenet,1999,89:147.　

7　ResendesBL ,WilliamsonRE ,MortonCC .Atthespeedofsound:Genediscoveryintheauditorysystem[J].AmJHumGenet,2001,69:923.　

8　TekinM ,ArnosKS ,PandyaA .Advancesinhereditarydeafness[J].Lancet,2001,358:1082.　

9　SteelKP ,BussoliTJ.Deafnessgenes:expressionsofsurpries[J].TIG ,1999,15:207.　

10　RobertsonND ,MortonCC .Beginningofamolecularerainhearinganddeafness[J].ClinGenet,1999,55:149.

本文信息

PDF(173k)

本文关键词相关文章

酵母双杂交技术耳聋基因克隆

本文作者相关文章

肖自安谢鼎华房海燕黄亮群施小六夏家辉