组织块培养法及胶原酶消化法分离培养豚鼠耳蜗微血管内皮细胞

Isolation and Cultivation of Cochlear Microvascular Endothelial Cells from Guinea Pigs by Tissue Nubbles Cultivation and Collagenase Digestion.

魏运军;张学渊

1:第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉科

2:第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉科重庆400038

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摘要

目的　建立稳定的豚鼠耳蜗微血管内皮细胞的培养方法。方法　采用显微解剖技术分离出豚鼠耳蜗血管纹 ,分别用组织块法及酶消化法进行培养及纯化。结果　耳蜗血管纹组织块培养后 2天 ,部分组织块边缘有散在的细胞生长 ,这些细胞逐渐增殖形成大片细胞集落 ;耳蜗血管纹组织经胶原酶消化后 1～ 3天 ,可观察到培养皿底由一些细胞组成的细胞岛 ;细胞纯化后大多呈多边形 ,致密融合时具有内皮细胞培养时典型的“铺路石样”外观 ,经免疫组化检测其内皮细胞标志性抗原Ⅷ因子 ,95 %以上的培养细胞的胞浆中呈棕黄色阳性反应。结论　组织块法及酶消化法能够获得体外培养的豚鼠耳蜗微血管内皮细胞

关键词

豚鼠;血管纹;内皮细胞;细胞培养;免疫细胞化学染色

基金项目(Foundation):

国家自然科学基金资助项目 (项目编号　 39870 834)

作者

魏运军;张学渊

参考文献

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