豚鼠耳蜗单离外毛细胞游离钙的胆碱能调控

Cholinergic Regulation of Intracellular Free Calcium Concentrations in the Isolated Outer Hair Cells of the Guinea Pig Cochlea

肖自安;谢鼎华;伍伟景;杨曙;杨川

1:中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉科和听力研究室

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摘要

目的　观察胆碱能兴奋剂和拮抗剂对豚鼠耳蜗单离外毛细胞 (OHC)内游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)的影响 ,探讨OHC内 [Ca2 + ]i的胆碱能调控机制。方法　健康豚鼠 15只处死 ,Hanks液中分离活性单离OHC ,Fluo - 3/AM负载 30min。分 7组进行不同干预 ,包括乙酰胆碱 (ACH ,胆碱能M和N受体兴奋剂 )、毒蕈碱 (M受体兴奋剂 )、阿托品 (M受体拮抗剂 )、庆大霉素 (N受体拮抗剂 )、加Hanks液对照组和不加干预对照组 ;另 1组为dHanks液中加ACh。用激光扫描共聚焦显微镜 (Bio-Rad ,英国 )观察OHC内 [Ca2 + ]i的变化。结果　Hanks液中不加干预试剂、加毒蕈碱、加Hanks液对照和无钙dHanks液中加ACh等 4组 ,[Ca2 + ]i在 2 5～ 30min内升幅 <1.10倍。Hanks液中加ACh组 [Ca2 + ]i最高升幅平均为 3.0 9倍 ;阿托品 +ACh组 [Ca2 + ]i为 2 .92倍 ;庆大霉素 +ACh组[Ca2 + ]i为 1.81倍。结论　豚鼠耳蜗传出神经递质ACh通过兴奋N受体 ,开放OHC的细胞膜钙离子通道 ,使细胞外Ca2 + 内流外毛细胞内 ;[Ca2 + ]i增加需要细胞外液中钙离子存在。

关键词

耳蜗;外毛细胞;钙;胆碱能调控

基金项目(Foundation):

国家自然科学基金资助项目 (3 9770 795 )

作者

肖自安;谢鼎华;伍伟景;杨曙;杨川

参考文献

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2　XieDH ,HensonMM ,BishopAL ,etal.Efferentterminalsinthecochleaofthemustachedbat:Quantitativedata[J].HearRes,1993,66:81.　

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耳蜗外毛细胞钙胆碱能调控

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