构建犬声带瘢痕模型及初步筛选声带瘢痕形成相关靶基因

The Construction of Canine Model of Vocal Cord Scar and Analysis of Target Genes Closely Related to Vocal Cord Scar

黄玉;刘豆;黄文霞;梁耕田

1:武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院)耳鼻咽喉-头颈外科

摘要
目的 采用低温等离子消融术构建犬声带瘢痕模型,并初步筛选出与声带瘢痕形成密切相关的靶基因。方法 对4只中华田园犬行低温等离子消融术,损伤左侧声带至肌层,对侧声带不予处理。于术前、术后即刻、术后3周和术后12周对犬双侧声带大体形态进行观察,通过HE染色观察声带病理结构变化,透射电镜观察声带超微结构变化。采用高通量测序分析双侧声带基因表达的差异,筛选出显著差异表达的靶基因。结果 术后3周术侧声带组织充血肿胀,边缘不齐,可见红色肉芽组织形成;术后12周声带创面局部挛缩凹陷,瘢痕形成;HE染色见瘢痕声带鳞状上皮层明显增厚,纤维层增厚、排列紊乱,局部成团状或束状聚集,肌层亦可见散在的纤维束;透射电镜下见间质增厚、密度不均,细胞肿胀,细胞间界线不清,细胞核增生、线粒体增多,细胞处于活跃状态。高通量测序分析发现众多基因家族参与了声带的瘢痕修复过程,其中密切相关的基因家族有IL家族、趋化因子CCL和CXCL家族、MMPs家族及其抑制剂TIMPs家族、Wnt家族、HSP家族、MAPK家族和TGF-β家族等。结论 本研究成功构建了犬声带瘢痕模型,并初步筛选出了与声带瘢痕形成密切相关的靶基因,为声带瘢痕机制的探索提供了一定的参考价值。
关键词
声带瘢痕;犬;高通量测序;靶基因
基金项目(Foundation):
武汉市科技局知识创新专项曙光计划(2022020801020554);; 武汉市卫健委青年项目(WX21Q24);武汉市卫健委面上项目(WX21A10);武汉市卫健委面上项目(WX18C05)
作者
黄玉;刘豆;黄文霞;梁耕田
参考文献

1 Mattei A,Magalon J,Bertrand B,et al.Cell therapy and vocal fold scarring[J].Eur Ann Otorhinolaryngol Head Neck Dis,2017,134(5):339-345.

2 Kumai Y.Pathophysiology of fibrosis in the vocal fold:current research,future treatment strategies,and obstacles to restoring vocal fold pliability[J].Int J Mol Sci,2019,20(10):2551.

3 Liu D,Qian T,Li P,et al.Asiatic acid improves extracellular matrix remodeling in vocal fold scarring via SMAD7 activation[J].Laryngoscope,2022,132(6):1237-1244.

4 刘升阳,叶犇.兔声带瘢痕的建立及其细胞外基质中转化生长因子-β1和α-平滑肌肌动蛋白表达的研究[J].影像研究与医学应用,2018,2(6):250-254.

5 Lim X,Tateya I,Tateya T,et al.Immediate inflammatory response and scar formation in wounded vocal folds[J].Ann Otol Rhinol Laryngol,2006,115(12):921-929.

6 梁耕田,段冰玉,张莹莹,等.犬声带瘢痕模型的建立及其细胞外基质中赖氨酰氧化酶、热休克蛋白70和透明质酸表达的研究[J].临床耳鼻咽喉头颈外科杂志,2017,31(2):116-122.

7 汪斌如,张莹莹,杨丽萍,等.CO2激光犬声带全切除后不同时间细胞外基质表达[J].听力学及言语疾病杂志,2020,28(6):669-673.

8 Bless DM,Welham NV.Characterization of vocal fold scar formation,prophylaxis,and treatment using animal models[J].Curr Opin Otolaryngol Head Neck Surg,2010,18(6):481-486.

9 王家佳,魏春生.声带瘢痕的形成及治疗进展[J].听力学及言语疾病杂志,2011,19(3):283-285.

10 Hedlund H,Mengarelli-Widholm S,Heinegard D,et al.Fibromodulin distribution and association with collagen[J].Matrix Biol,1994,14(3):227-232.

11 卞晶晶,郭玉娜,唐元章,等.低温等离子消融术与射频热凝术治疗三叉神经痛的对照研究[J].中国医药,2022,17(2):219-222.

12 Belvisi MG,Bottomley KM .The role of matrix metalloproteinases (MMPs) in the pathophysiology of chronic obstructive pulmonary disease (COPD):a therapeutic role for inhibitors of MMPs[J]?Inflammation Research,2003,52(3):95-100.

13 Gaertner R,Jacob MP,Prunier F,et al.The plasminogen-MMP system is more activated in the scar than in viable myocardium 3 months post-MI in the rat[J].Journal of Molecular & Cellular Cardiology,2005,38(1):193-204.

14 Keskin ES,Keskin ER,Ozturk MB,et al.The effect of MMP-1 on wound healing and scar formation[J].Aesthetic Plast Surg,2021,45(6):2973-2979.

15 张意钗,罗胜强,岑美婷.IL-33、TIMP-1、MMP-2联合乙肝五项指标诊断慢性HBV肝纤维化的应用价值[J].临床和实验医学杂志,2022,21(13):1387-1390.

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